实验技术
-
AAV纯化试剂配制和浓度
AAV碘克沙醇纯化法常用试剂配制浓度 5 M NaCl 146.1 g NaCl Up to 500 mL Ultrapure water 1 M Tris HCl (pH 8.5) 12.11 g Tris base Up to 100 …
-
流式细胞仪(FACS)原理及其应用注意事项
流式细胞术(FCM)定义: FCM是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的技术。 特点: 单细胞的流动的, 活细胞的 定量的,多参数的,高统计学精度的,分选细胞。 (一)仪器基本组成结构 …
-
MFI: 用image J测量计算荧光染色的mean fluorescence intensity
1、加开图像后,提取出单一通道(Image-Color-Split Channels) 2、调整阈值,选择适当的区域(Image-Adjust-Threshold) 注意: 如果图片上有比例尺,必须调节Threshold,或者框选比例尺的区…
-
噬菌体稀释和储存缓冲液配制SM Buffer
SM buffer 配方: 200 mM NaCl2 10 mM MgSO4 50 mM Tris-HCl, pH 7.5 配制过程: 1.称取 11.7 g NaCl2 和 1.4 g MgSO4 并添加到干净的 1L 蓝盖烧瓶或其他高压…
-
20X SSPE配制配方
NaCl 0.15M; Sodium citrate 0.01M; EDTA 0.001M 加入1L去离子水。 pH 7.25~7.55
-
Matrigel使用:包被成功判断与絮状物
涂有Matrigel的盘子或平板在室温(约21°C)下孵化1小时,或在4°C的冰箱中孵化一夜后即可使用。它们可以在4°C下储存达一周。孵化或储存在冰箱中时,应使用干净的保鲜膜(或同等的材料)覆盖以防止溢出。避免倾斜以防止Matrigel的表…
-
Hoechst 33342的储存使用浓度和配制方法
试剂 浓度 体积 Hoechst 33342储存液 10 mg/mL 0.001 mL D-PBS n/a 1.999 mL 使用浓度 0.02 mg/mL 2.0 mL
-
0.1%Triton X-100配制方法
0.1%Triton X-100配方 试剂 Final concentration 体积 Triton X-100 100% 0.01 mL D-PBS n/a 10 mL 终浓度 0.1% (Triton X-100) 10.01 mL
-
从小鼠皮肤伤口分离巨噬细胞用于单细胞RNA测序
了解组织修复中的巨噬细胞异质性是一个重大挑战。在这里,我们描述了一个协议,它结合了从皮肤伤口中分离免疫细胞和随后基于流式细胞仪的伤口巨噬细胞分拣和单细胞RNA测序。我们使用原始Smart-seq2协议的修改版来提高速度和准确性。该协议对于分…
-
小鼠HER2+乳腺癌脑转移的稳定同位素追踪和稳态代谢组学的优化方案
Optimized protocol for stable isotope tracing and steady-state metabolomics in mouse HER2+ breast cancer brain metastasi…