实验技术
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试剂材料纯度分级定义
试剂材料分级Material Grade 分级意义Definition Analytical Grade Designates reagents suitable for use in analytical procedures. 指适合在…
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流式分选缓冲液配方和配制-FACS buffer
流式分选缓冲液组份FACS buffer 试剂Reagent 终浓度Final concentration Amount/500mL BSA 0.5% 2.5 g EDTA, 0.5 M 2 mM 2 mL PBS, pH 7.4 498 …
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磁珠分选缓冲液配方MACS buffer
MACS buffer 试剂Reagent 终浓度 称取量/500mL BSA 0.5% 2.5 g EDTA, 0.5 M 2 mM 2 mL PBS, pH 7.4 498 mL 总体积 500 mL Store at 4°C for …
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人T细胞培养基配制及培养方案
Human T cell培养基组分 成份名 终浓度 体积/500mL Human serum 2.5% 12.5 mL L-glutamine 2 mM 5 mL Penicillin-streptomycin 100 U/mL and 1…
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人外周血 T 细胞分离方法
本节介绍从全血中分离外周血单个核细胞 (PBMC) 和pan T 细胞富集的方法。在分离 PBMC 时，可以使用多种不同的来源样品（如：全血、血沉棕黄层、白细胞减少系统室等）。 注意：所有步骤都应在层流环境中进行，使用适当的无菌技术。1.确…
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2xHeBS配制
HEPES-buffered saline (HeBS), 2× 1.称量配制以下组分至800 ml H2O: 16.36 g NaCl (mol. wt., 58.44; 0.28 M final)11.9 g HEPES (mol. w…
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CRISPR PX330 sgRNA质粒克隆构建方法
sgRNA design Figure 1. From Staying on target with CRISPR-Cas . Dana Carroll , Nature Biotechnology 31,807–809 (201…
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小鼠基因型PCR鉴定方法
1.将小鼠剪尾巴0.5~1cm左右。2.添加 200 µl Direct PCR 裂解缓冲液和 10 µl 蛋白酶 K（20mg/ml，-20 oC）。3.65 oC 孵育过夜。4.在 85 oC下加热样品 45 分钟以灭活蛋白酶 K。5.…
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AAV/Lenti滴度qPCR鉴定引物序列
引物名称 序列 Forward primer 5’-CCCACTTGGCAGTACATCAA-3’ Reverse primer 5’-GCCAAGTAGGAAAGTCCCAT-3’ 引物Blast结果： Sequence (5′…
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计算单位体积质粒的拷贝数（copy number）
第一步，计算质粒的分子量。假设一个DNA碱基对（bp）的平均重量为650道尔顿（Da），一摩尔的碱基对（bp）的重量为650克，即任何双链DNA模板的分子量可以通过取其长度（bp）与每个碱基对重量的乘积来估计。 First, …
