1.将小鼠剪尾巴0.5~1cm左右。
2.添加 200 µl Direct PCR 裂解缓冲液和 10 µl 蛋白酶 K（20mg/ml，-20 oC）。
3.65 oC 孵育过夜。
4.在 85 oC下加热样品 45 分钟以灭活蛋白酶 K。
5.PCR反应配制与条件
| 试剂 |
(µl) |
| 5 ×Gotaq PCR Buffer |
4 |
| MgCl2 (50mM) |
0.8 |
| dNTPs (10mM) |
0.5 |
| Primer Mix ( 10µM) |
1 |
| Tail DNA |
2 |
| Gotaq polymerase |
0.2 |
| ddH2O |
11.5 |
| 总体积 | 20 |
Step 1: 95oC, 4min
Step 2: 95oC, 30 sec
Step 3: 55 or 60 oC, 30 sec
Step 4: 72oC, 1 min
Step 5: Repeat steps 2-4 for 40 cycles
Step 6: 72oC,10 min.
如若转载，请注明出处：https://www.ouq.net/2149.html
微信打赏，为服务器增加50M流量
支付宝打赏，为服务器增加50M流量
在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。常用最小孔径的Tanswell膜（0.4um ）主要应用于药物转导研究。细胞侵袭，趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。 细胞从膜的…
PX330; SpCas9 and single guide RNA PX458; SpCas9-2A-EGFP and single guide RNA PX459; SpCas9-2A-Puro and single guide RNA…
设计质粒载体是一项复杂而有趣的任务，通常需要考虑到载体的用途、宿主细胞类型、表达水平、选用的启动子、标签等多个因素。以下是设计质粒载体的一些建议步骤： 明确研究目的： 定义质粒的主要用途，是用于表达蛋白质、RNA干扰、基因编辑等。 确定宿主…
本文列出一代测序常用的通用引物，一般由测序公司免费提供。 引物名称 引物序列 27F AGAGTTTGATCMTGGCTCAG 1492R GGTTACCTTGTTACGACTT 86F GCTCAGTAACACGTGG 1340R CGG…
兔（Rabbit）是 哺乳类 兔形目 兔科 下属所有的属的总称。 生物学 分类动物界 脊索动物门 脊椎动物亚门 哺乳纲 兔形目 。 1、一般特性及生活习性 家兔虽然经人类长期的驯化和培育已成为一种常用的实验动物，但仍然继承了其祖先野生穴兔的…
