实验方法
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Kozak序列的功能和应用
Kozak 序列是在真核生物的mRNA中共有的(gcc)gccRccAUGG序列 。它在翻译过程的启动中扮演了重要角色。 Kozak 序列通常被认为是 GCCGCCACCATGG，其中 ATG 是起始密码子（通常是信号序列的起始）。建议使用…
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常用疼痛动物模型
神经病理性疼痛模型 1. 皮质和丘脑痛模型造模方法：通过向躯体感觉皮质或丘脑核团微量注射兴奋性毒性物质（如苦味毒素或红藻氨酸）诱导疼痛。直接在丘脑注射IV型胶原常用于模拟出血性脑卒中。该模型可导致机械和热痛敏，伴随自发疼痛行为，如抬举、摇动…
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Transwell孔径0.4um3um8um选择原则
在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。常用最小孔径的Tanswell膜（0.4um ）主要应用于药物转导研究。细胞侵袭，趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。 细胞从膜的…
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CRISPR质粒区别
PX330; SpCas9 and single guide RNA PX458; SpCas9-2A-EGFP and single guide RNA PX459; SpCas9-2A-Puro and single guide RNA…
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如何设计质粒载体
设计质粒载体是一项复杂而有趣的任务，通常需要考虑到载体的用途、宿主细胞类型、表达水平、选用的启动子、标签等多个因素。以下是设计质粒载体的一些建议步骤： 明确研究目的： 定义质粒的主要用途，是用于表达蛋白质、RNA干扰、基因编辑等。 确定宿主…
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常用通用测序引物名称和序列
本文列出一代测序常用的通用引物，一般由测序公司免费提供。 引物名称 引物序列 27F AGAGTTTGATCMTGGCTCAG 1492R GGTTACCTTGTTACGACTT 86F GCTCAGTAACACGTGG 1340R CGG…
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实验兔的解剖学特征和生理学特性
兔（Rabbit）是 哺乳类 兔形目 兔科 下属所有的属的总称。 生物学 分类动物界 脊索动物门 脊椎动物亚门 哺乳纲 兔形目 。 1、一般特性及生活习性 家兔虽然经人类长期的驯化和培育已成为一种常用的实验动物，但仍然继承了其祖先野生穴兔的…
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ED50，Ki50，IC50，Kd50和pIC50的定义和区别
EC50值:药物达到最大临床功效(有时是抑制或刺激效果)50%时的浓度。这是一个药用术语。 ED50值:50%的个体表现特定药效时药物的有效剂量(而非浓度)。IC50值: 达到50%抑制效果时抑制剂的浓度。Ki50值: 检测到50%抑制效果…
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FACS：细胞染色背景高、特异性低如何处理
如何固定和渗透细胞（小鼠和人类）以进行特异性细胞内染色： 1： 我们常规使用的一种廉价而有效的方法是用 10%缓冲福尔马林溶液在 4°C 下固定 15-30 分钟，然后用 TBST（0.2% TritonX-100）在室温下透化细胞 20 …
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FACS：单细胞分选后如何提高单细胞活率
主要有三个方面需要考虑。一是分离/纯化/分拣步骤中的方法、温度和缓冲液。如果细胞是从组织中分离出来的，最佳的时间、酶解和/或机械方法可能有助于更好地保持细胞活力。温度也很关键，因此在分离/纯化/分拣步骤中始终将细胞保持在 4°C 或冰上有助…
