实验方法

  • Transwell孔径0.4um3um8um选择原则

    在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。常用最小孔径的Tanswell膜(0.4um )主要应用于药物转导研究。细胞侵袭,趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。 细胞从膜的…

    05/06/2024
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  • CRISPR质粒区别

    PX330; SpCas9 and single guide RNA PX458; SpCas9-2A-EGFP and single guide RNA PX459; SpCas9-2A-Puro and single guide RNA…

    实验方法 04/07/2024
    238
  • 如何设计质粒载体

    设计质粒载体是一项复杂而有趣的任务,通常需要考虑到载体的用途、宿主细胞类型、表达水平、选用的启动子、标签等多个因素。以下是设计质粒载体的一些建议步骤: 明确研究目的: 定义质粒的主要用途,是用于表达蛋白质、RNA干扰、基因编辑等。 确定宿主…

    实验方法 12/27/2023
    228
  • 常用通用测序引物名称和序列

    本文列出一代测序常用的通用引物,一般由测序公司免费提供。 引物名称 引物序列 27F AGAGTTTGATCMTGGCTCAG 1492R GGTTACCTTGTTACGACTT 86F GCTCAGTAACACGTGG 1340R CGG…

    实验方法 12/15/2023
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  • 实验兔的解剖学特征和生理学特性

    兔(Rabbit)是 哺乳类 兔形目 兔科 下属所有的属的总称。 生物学 分类动物界 脊索动物门 脊椎动物亚门 哺乳纲 兔形目 。 1、一般特性及生活习性 家兔虽然经人类长期的驯化和培育已成为一种常用的实验动物,但仍然继承了其祖先野生穴兔的…

    实验方法 12/13/2023
    319
  • ED50,Ki50,IC50,Kd50和pIC50的定义和区别

    EC50值:药物达到最大临床功效(有时是抑制或刺激效果)50%时的浓度。这是一个药用术语。 ED50值:50%的个体表现特定药效时药物的有效剂量(而非浓度)。IC50值: 达到50%抑制效果时抑制剂的浓度。Ki50值: 检测到50%抑制效果…

    实验方法 10/31/2023
    352
  • FACS:细胞染色背景高、特异性低如何处理

    如何固定和渗透细胞(小鼠和人类)以进行特异性细胞内染色: 1: 我们常规使用的一种廉价而有效的方法是用 10%缓冲福尔马林溶液在 4°C 下固定 15-30 分钟,然后用 TBST(0.2% TritonX-100)在室温下透化细胞 20 …

    实验技术 10/27/2023
    213
  • FACS:单细胞分选后如何提高单细胞活率

    主要有三个方面需要考虑。一是分离/纯化/分拣步骤中的方法、温度和缓冲液。如果细胞是从组织中分离出来的,最佳的时间、酶解和/或机械方法可能有助于更好地保持细胞活力。温度也很关键,因此在分离/纯化/分拣步骤中始终将细胞保持在 4°C 或冰上有助…

    实验技术 10/27/2023
    264
  • FACS:评价样本固定和样品细胞通透不充分的指标

    一般来说,当流式细胞仪检测到的信号暗淡/微弱或大部分停留在阴性对照(无荧光信号)时,说明样品固定和/或通透性不足。具体来说,如果您要寻找的细胞内蛋白质的表达水平是一个变量,您应该能看到一个明显的阳性峰/信号,并与阴性对照分开。如果您感兴趣的…

    实验方法 10/27/2023
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  • 错误使用的实验动物麻醉方法导致拒稿

    近期有一项报道,国内一位科研人员向《Scientific Reports》投稿遭拒,原因是该项研究在动物实验过程中,使用水合氯醛麻醉,而该物质作为麻醉剂,更应该是镇静剂,使用时其镇痛效果较差,并且有导致腹膜炎等的副作用,实验过程对动物不人道…

    10/05/2023
    163