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实验方法总结(4):组织水平部分
1、免疫组化 1.1 SP法 单克隆抗体MMP-2、MMP-9,SP试剂盒购自ZYMED公司(1 100)。3%H2O2封闭内源性过氧化物酶,微波加热抗原修复, 10%正常羊血清孵育,滴加一抗, 4℃冰箱中过夜, PBS缓冲液(Na2HPO…
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实验方法总结(3):动物模型部分
从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下: 从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析: 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备:GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为:空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠,雄性…
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实验方法总结(2):细胞生物学部分
1. 原代细胞分离与培养 1.1原代细胞分离 人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,必须将现有的组织块充分散开,使细胞解离出来。 悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的…
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实验方法总结(1):基因操作工具
1、基因A(GeneA)的敲减载体构建 版本1:针对GeneA,在Sigma网站上搜索已验证过敲减效率的shRNA序列,合成后两端加上酶切位点,合成双链DNA oligo,成为含干扰序列的具对应粘性末端的shRNA表达框架。以EcorI和B…