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SUMO化在蛋白翻译修饰中的作用和机制
1.概念介绍: 蛋白质是生命活动中各种功能的执行者,其功能正常与否决定着生命活动能否有序、高效的进行,而其中蛋白质翻译后修饰起着至关重要的作用。蛋白质翻译之后,翻译后修饰改变了蛋白质中氨基酸残基上的生物化学官能团,进而改变其化学性质或结构,…
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数字PCR digital PCR
概述: Digital PCR(dPCR)即数字PCR,它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可以直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。 数字PCR是最新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是…
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凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)
凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA) 概述: 凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究…
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Luciferase报告基因系统
概述: Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferi…
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荧光原位杂交技术FISH
概述: 原位杂交技术是以核酸分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的核酸分子(探针,Probe)与目标核酸分子杂交,再用相应的方法检测探针的存在,从而揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于 1969 年,Gall 和 …
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RNA-蛋白互作:Pull-Down实验
概述: 此方法是利用脱硫生物素末端标记的 RNA 和链霉亲和素磁珠标记的来高效富集RNA 结合蛋白(RBP)。RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋…
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染色质免疫共沉淀技术ChIP实验原理和方法
染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 概述: 真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫…
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RACE技术原理和方法
RACE技术 概述: 近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的…
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DNase I超敏感位点的定位研究原理和方法
DNase I超敏感位点的定位研究 概述: 早在20世纪80年代初期,研究人员发现染色质对脱氧核糖核酸酶I(DNase I)的敏感性与基因的转录有关,即当一个基因处于转录活性状态时,含有这个基因的染色质区域对DNase I降解的敏感性要比无…
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Real time实时定量PCR实验原理和方法
概述: Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR(real-time quantitative PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行总量分析或通…