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CRISPR PX330 sgRNA质粒克隆构建方法
sgRNA design Figure 1. From Staying on target with CRISPR-Cas . Dana Carroll , Nature Biotechnology 31,807–809 (201…
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小鼠基因型PCR鉴定方法
1.将小鼠剪尾巴0.5~1cm左右。2.添加 200 µl Direct PCR 裂解缓冲液和 10 µl 蛋白酶 K（20mg/ml，-20 oC）。3.65 oC 孵育过夜。4.在 85 oC下加热样品 45 分钟以灭活蛋白酶 K。5.…
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AAV/Lenti滴度qPCR鉴定引物序列
引物名称 序列 Forward primer 5’-CCCACTTGGCAGTACATCAA-3’ Reverse primer 5’-GCCAAGTAGGAAAGTCCCAT-3’ 引物Blast结果： Sequence (5′…
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计算单位体积质粒的拷贝数（copy number）
第一步，计算质粒的分子量。假设一个DNA碱基对（bp）的平均重量为650道尔顿（Da），一摩尔的碱基对（bp）的重量为650克，即任何双链DNA模板的分子量可以通过取其长度（bp）与每个碱基对重量的乘积来估计。 First, …
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AAV纯化试剂配制和浓度
AAV碘克沙醇纯化法常用试剂配制浓度 5 M NaCl 146.1 g NaCl Up to 500 mL Ultrapure water 1 M Tris HCl (pH 8.5) 12.11 g Tris base Up to 100 …
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Star Protocol: 从宏基因组中提取 CRISPR 靶向序列
基于同源性的搜索通常用于从宏基因组中发现移动遗传元件 (MGE)，但它在很大程度上依赖于数据库中的参考基因组。 该方法可以在不使用参考数据库的情况下从组装的人宏基因组序列中提取 CRISPR 靶向序列。 我们描述了宏基因组重叠群的组装、CR…
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国家自然科学基金发布肿瘤演进与诊疗的分子功能可视化研究重大研究计划2022年度项目指南
肿瘤演进与诊疗的分子功能可视化研究重大研究计划2022年度项目指南 肿瘤演进与诊疗的分子功能可视化研究重大研究计划旨在通过对肿瘤演进和诊疗的关键分子功能可视化，形成对恶性肿瘤本质的新认识。 一、科学目标 本重大研究计划的总体科学目标：揭示肿…
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国家自然科学基金申请项目评审结果bug查询方法
2022年度国家自然科学基金申请项目评审结果即将公布（预计8月19日），但是一般情况下都是单位系统先能查到，个人要迟一些，所以要想第一时间知道结果只能等单位通知，而有些单位总是慢半拍，在等的这个过程对于每个申请人来说都是十分煎熬，那怎么解决…
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流式细胞仪（FACS）原理及其应用注意事项
流式细胞术(FCM)定义: FCM是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的技术。 特点: 单细胞的流动的， 活细胞的 定量的，多参数的，高统计学精度的，分选细胞。 (一）仪器基本组成结构 …
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2022上海市引进人才落户政策
上海市引进人才申办本市常住户口办法 （政策有效期至2025年11月30日） 第一条(目的) 为进一步发挥人才在促进新时代上海经济社会高质量发展中的核心作用，完善与上海经济社会发展相适应的人才引进政策体系，根据有关法律、法规和市委、市政府《关…
