常用资源
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计算单位体积质粒的拷贝数(copy number)
第一步,计算质粒的分子量。假设一个DNA碱基对(bp)的平均重量为650道尔顿(Da),一摩尔的碱基对(bp)的重量为650克,即任何双链DNA模板的分子量可以通过取…
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AAV纯化试剂配制和浓度
AAV碘克沙醇纯化法常用试剂配制浓度 5 M NaCl 146.1 g NaCl Up to 500 mL Ultrapure water 1 M Tris HCl (pH 8.5…
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流式细胞仪(FACS)原理及其应用注意事项
流式细胞术(FCM)定义: FCM是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的技术。 特点: 单细胞的流动的, 活细胞的 定量的,多参…
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MFI: 用image J测量计算荧光染色的mean fluorescence intensity
1、加开图像后,提取出单一通道(Image-Color-Split Channels) 2、调整阈值,选择适当的区域(Image-Adjust-Threshold) 注意: 如果图…
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噬菌体稀释和储存缓冲液配制SM Buffer
SM buffer 配方: 200 mM NaCl2 10 mM MgSO4 50 mM Tris-HCl, pH 7.5 配制过程: 1.称取 11.7 g NaCl2 和 1….
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20X SSPE配制配方
NaCl 0.15M; Sodium citrate 0.01M; EDTA 0.001M 加入1L去离子水。 pH 7.25~7.55
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Matrigel使用:包被成功判断与絮状物
涂有Matrigel的盘子或平板在室温(约21°C)下孵化1小时,或在4°C的冰箱中孵化一夜后即可使用。它们可以在4°C下储存达一周。孵化或储存在冰箱中时,应使用干净的保鲜膜(或同…
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Hoechst 33342的储存使用浓度和配制方法
试剂 浓度 体积 Hoechst 33342储存液 10 mg/mL 0.001 mL D-PBS n/a 1.999 mL 使用浓度 0.02 mg/mL 2.0 mL
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0.1%Triton X-100配制方法
0.1%Triton X-100配方 试剂 Final concentration 体积 Triton X-100 100% 0.01 mL D-PBS n/a 10 mL 终浓度…
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从小鼠皮肤伤口分离巨噬细胞用于单细胞RNA测序
了解组织修复中的巨噬细胞异质性是一个重大挑战。在这里,我们描述了一个协议,它结合了从皮肤伤口中分离免疫细胞和随后基于流式细胞仪的伤口巨噬细胞分拣和单细胞RNA测序。我们使用原始Sm…