1.将小鼠剪尾巴0.5~1cm左右。
2.添加 200 µl Direct PCR 裂解缓冲液和 10 µl 蛋白酶 K（20mg/ml，-20 oC）。
3.65 oC 孵育过夜。
4.在 85 oC下加热样品 45 分钟以灭活蛋白酶 K。
5.PCR反应配制与条件
| 试剂 |
(µl) |
| 5 ×Gotaq PCR Buffer |
4 |
| MgCl2 (50mM) |
0.8 |
| dNTPs (10mM) |
0.5 |
| Primer Mix ( 10µM) |
1 |
| Tail DNA |
2 |
| Gotaq polymerase |
0.2 |
| ddH2O |
11.5 |
| 总体积 | 20 |
Step 1: 95oC, 4min
Step 2: 95oC, 30 sec
Step 3: 55 or 60 oC, 30 sec
Step 4: 72oC, 1 min
Step 5: Repeat steps 2-4 for 40 cycles
Step 6: 72oC,10 min.
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